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    值得了解的熒光顯微鏡操作方法

     我們可能介紹金相顯微鏡,視頻顯微鏡等種類較多,比如說它們的特征,操作方法,以及保養方法等等。有朋友就問,可不可以介紹下熒光顯微鏡的操作方法,以及如何使用時的一些注意要點呢?今天小編就來帶大家了解一下:

    熒光顯微鏡使用方法和操作規程  
    1.用窗簾遮蔽光線,關閉房間內的燈光,除去顯微鏡的防塵罩,確保顯微鏡燈室通風良好、無遮蓋。裝上汞燈燈箱,并轉動燈箱卡圈上的撥桿,將燈箱與鏡臂連接。  
    2.將汞燈燈箱的電源插頭插入熒光電源箱后的插座,再將熒光電源箱的插頭插入220V外接電源。  
    3.打開電源開關,電壓表顯示出電源電壓,如電源電壓波動不大于額定電壓值的±5%,即可按下啟動開關點燃汞燈,如因天氣太冷或電壓不穩定等原因,一次啟動未點燃汞燈,可以多撳動幾次。待超高壓汞燈弧光達到穩定狀態并達到最大發光效率,即可開始工作。  
    4.燈泡的調中:  
    (1)任選一塊標本放在載物臺上;  
    (2)轉動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路,轉動濾色片組轉換手輪,將紫光(V)或藍光(B)或綠光(G)激發濾色片組轉入光路,并將10X熒光物鏡轉入光路;  
    (3)調節粗微調手輪,將標本像調焦清晰;  
    (4)前后推動垂直照明器右邊的聚光鏡調焦推桿,使視場光欄成像清晰,轉動視場光欄撥桿將視場光欄收小,調節視場光欄調中螺釘使視場光欄居中,然后再將視場光欄開至最大;  
    (5)轉動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路,前后調節燈箱上的聚光鏡撥桿,使汞燈的弧光在視場內成像清晰;  
    (6)調整燈箱上的燈泡水平調節螺釘和垂直調節螺釘,使汞燈的弧光居中;  
    (7)調整反光鏡水平調節螺釘和垂直調節螺釘,使光源的反射像與汞燈的弧光分開;  
    (8)轉動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路,此時視場照明均勻。  
    5.熒光觀察:  
    (1)將熒光染色標本放到載物臺上。  
    (2)將10X平場物鏡或40X熒光物鏡轉入光路,調節載物臺縱橫移動手輪,將標本移入光路。  
    (3)轉動濾光片轉換撥輪,將熒光染色標本所需要的激發濾光片組轉入光路。激發濾光片組編號刻在濾片組轉換撥輪上。濾光片選擇正確與否,是熒光顯微鏡能否得到正確應用的關鍵。選用濾光片時,必須遵守斯托克斯定律:激發濾光片的透射波長<雙色束分離器的透射波長<阻斷濾光片的透射波長。  
    由于激發濾光片、雙色束分離器和阻斷濾光片,出廠時已按其用途和本身的光學特性進行了嚴格的組合匹配,在觀察和攝影時,只需選擇濾光片組即可。  
    (4)調節粗調手輪,當看清熒光圖像輪廓后,再用微調手輪調焦,直至看到清晰的熒光圖像。  
    (5)當需要得到較強的熒光圖像時,可轉動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移入光路,可獲得較明亮的熒光圖像。  
    (6)當需要使用40X或100X熒光物鏡觀察時,應在標本和物鏡間加上甘油,油中不能有影響觀察的小泡或雜質。使用時可使甘油慢慢浸潤一會兒,然后輕輕左右來回轉動物鏡轉換器以排除氣泡。  
    6.熒光顯微攝影——顯微鏡攝像頭  
    由于熒光圖像一般均較明場觀察暗得多,所以進行熒光顯微攝影需要較長的曝光時間,在曝光時應注意避免儀器震動。  
    熒光顯微鏡攝影技術對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易褪色減弱,要即時攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術基本相同。
     

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